|
|
Mikrofluidický enzymatický reaktor pro testování léčiv
Königsmarková, Kristýna ; Peš,, Ondřej (oponent) ; Přikryl,, Jan (vedoucí práce)
Předložená diplomová práce se zabývá využitím mikrofluidiky pro účely mikrofluidického enzymatického reaktoru na testování léčiv. Na problematiku nejprve nahlíží z teoretického hlediska – popisuje mikrofluidiku, jakožto nově se rozvíjející a perspektivní obor, metody výroby mikrofluidických zařízení, materiály, biomedicínské aplikace i výhody a nevýhody mikrofluidiky jako takové. Dále se věnuje oblasti analytického využití enzymů v rámci enzymatických reaktorů. V první části experimentální práce byly optimalizovány podmínky pro testování enzymů metabolizmu xenobiotik v játrech, konkrétně na modelu metabolizmu kumarinů metodou spektrofluorimetrie. Druhá část experimentální práce se zabývala optimalizací podmínek fabrikace mikrofluidických čipů z materiálu OSTE (off-stoichiometry Thiol Ene) metodou "soft" litografie. Následně byla otestována funkčnost vyrobených čipů. Na základě výsledků obou částí experimentální práce bylo provedeno vyhodnocení s posouzením vhodnosti jejich propojení pro budoucí výzkum – testování enzymatické aktivity mikrosomů a modelové biotransformace léčiv uvnitř kanálků fabrikovaných zařízení.
|
|
|
Mikrofluidický enzymatický reaktor pro testování léčiv
Königsmarková, Kristýna ; Peš,, Ondřej (oponent) ; Přikryl,, Jan (vedoucí práce)
Předložená diplomová práce se zabývá využitím mikrofluidiky pro účely mikrofluidického enzymatického reaktoru na testování léčiv. Na problematiku nejprve nahlíží z teoretického hlediska – popisuje mikrofluidiku, jakožto nově se rozvíjející a perspektivní obor, metody výroby mikrofluidických zařízení, materiály, biomedicínské aplikace i výhody a nevýhody mikrofluidiky jako takové. Dále se věnuje oblasti analytického využití enzymů v rámci enzymatických reaktorů. V první části experimentální práce byly optimalizovány podmínky pro testování enzymů metabolizmu xenobiotik v játrech, konkrétně na modelu metabolizmu kumarinů metodou spektrofluorimetrie. Druhá část experimentální práce se zabývala optimalizací podmínek fabrikace mikrofluidických čipů z materiálu OSTE (off-stoichiometry Thiol Ene) metodou "soft" litografie. Následně byla otestována funkčnost vyrobených čipů. Na základě výsledků obou částí experimentální práce bylo provedeno vyhodnocení s posouzením vhodnosti jejich propojení pro budoucí výzkum – testování enzymatické aktivity mikrosomů a modelové biotransformace léčiv uvnitř kanálků fabrikovaných zařízení.
|
|
|
Charakterizace enzymového reaktoru s imobilizovanou alkalickou fosfatázou
Plecitá, Denisa ; Kučerová, Zdenka (vedoucí práce) ; Miarková, Eva (oponent)
Fosforylace patří mezi jednu z nejdůležitějších post-translačních modifikací proteinů. Studium procesu fosforylace a defosforylace je velice důležité, neboť abnormální fosforylace proteinů souvisí s řadou vážných onemocnění lidí. Jedním z metod identifikace míst fosforylace proteinů je porovnání hmotnostních spekter vzorku před a po defosforylaci fosfatázou. Využití imobilizovaných forem fosfatáz má oproti volným formám řadu výhod, např. možnost opakovaného použití a zvýšení stability enzymu po imobilizaci. Cílem této bakalářské práce bylo charakterizovat vlastnosti enzymového reaktoru - imobilizované hovězí alkalické fosfatázy ze sliznice střeva. Alkalická fosfatáza byla imobilizována přes své volné aminoskupiny na magnetické částice obalené celulózou aktivovanou divinylsulfonem. Při stanovení aktivity byl používán jako substrát p- nitrofenylfosfát. Byl porovnán vliv pH a koncentrace Mg2+ iontů na aktivitu volné a imobilizované alkalické fosfatázy. Dále byla sledována skladovací a teplotní stabilita obou forem enzymu a možnost opakovaného využití imobilizované fosfatázy. Klíčová slova: enzymový reaktor vlastnosti alkalické fosfatázy magnetické částice imobilizace enzymů defosforylace
|
host ::
RSS.